Détection moléculaire du virus de la Dengue par RT-PCR

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Détails de la référence

Description:

Détection moléculaire du virus de la dengue par la méthode RT-PCR en temps réel. 

Catégorie d'analyse:
Détection moléculaire
Agent pathogène:
Virus de la Dengue
Laboratoire:
Infections et maladies:
  • Fièvre dengue hémorragique (DHF)
  • Fièvre de la dengue
  • Dengue avec syndrome de choc
Spécimen:

Les échantillons de sérum sont préférables; toutefois, les tests peuvent aussi être réalisés sur des échantillons de plasma ou de liquide céphalo-rachidien (LCR). L’analyse d’autres liquides et tissus corporels pourrait être envisagée; veuillez communiquer avec le laboratoire de diagnostic des zoonoses virales pour vérifier si d’autres échantillons peuvent être utilisés. Le volume minimum est de 600 µl.

Méthode de prélèvement:

Prélever le sang dans des tubes de séparation du sérum – soumettre dans un tube en « O » de 2 ml.

Manipulation, entreposage et expédition des spécimens:

Congeler les échantillons jusqu’à leur envoi pour analyse. Expédier les échantillons congelés sur glace sèche.

Transport des marchandises dangereuses:

L'expédition des prélèvements doit être confiée à une personne détenant un certificat de formation TMD, conformément au Règlement sur le TMD. Pour plus d'information sur la catégorisation des matières à des fins d'expédition, veuillez consulter la partie 2 de l'appendice 3 du règlement ou la section 3.6.2 du règlement de l'IATA sur les produits dangereux.

Pour obtenir des renseignements supplémentaires dans d’autres langues sur le transport de matières infectieuses, cliquez sur le lien ci-dessous.

http://www.who.int/ihr/capacity-strengthening/infectious-substances/fr/

Critères relatifs aux patients:

Infection par le virus de la denguesoupçonnée et antécédents de voyage pertinents. 

Documents d'accompagnement:

Requête d’analyse pour les zoonoses virales complétée, incluant le nom, l’adresse et le numéro de téléphone du laboratoire expéditeur. Le nom ou l’identificateur (no de référence de l’échantillon) du patient, sa date de naissance, les analyse(s) demandée(s), le type d’échantillon, la date de prélèvement de l’échantillon, la date du début des symptômes, ainsi que l’histoire clinique et les antécédents de voyage du patient.

Commentaires:

Il est à noter que le moment du prélèvement de l’échantillon est crucial sur le plan de l’apparition des symptômes pour déterminer les analyses à effectuer et pour l’interprétation des résultats. 

Méthodes et interprétation des résultats:

Détection du virus de la dengue par RT-PCR en temps réel TaqMan. Quatre épreuves uniplexes distinctes ciblant chacun des quatre sérotypes du virus de la dengue sont réalisées; un résultat est jugé positif si l’une ou l’autre des cibles sont détectées et si la valeur Ct se situe à l’intérieur du seuil préétabli pour une épreuve ou un sérotype précis.

Délai d'exécution:

21 jours civils.

Coordonnées:
Téléphone: (204) 789-6097 or (204) 789-2106
Télécopieur: (204) 789-2082
Références:
  1. Johnson, B.W., Russell, B.J. and Lanciotti, R.S. Serotype-specific detection of dengue viruses in a fourplex real-time reverse transcriptase PCR assay. 2005. J. Clin. Micro. 43; 4977-4983.
  2. Lanciotti, R.S., Calisher, C.H., Gubler, D.J., Chang, G.J., and Vorndam, V. Rapid detection and typing of dengue viruses from clinical samples by using reverse transcriptase-polymerase chain reaction. 1992. J. Clin. Micro. 30; 545-551.
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