Détection sérologique des anticorps dirigés contre le virus de la Dengue par PRNT
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Détails de la référence
Détection sérologique d’anticorps neutralisant le virus de la dengue (DEN) au moyen du test de séroneutralisation par réduction des plages (PRNT).
- Fièvre dengue hémorragique (DHF)
- Fièvre de la dengue
- Dengue avec syndrome de choc
Sérum. Volume minimum requis: 250 µl.
Tubes de 2 ml avec bouchon à vis.
Refrigérer ou congeler les échantillons jusqu’au moment de leur envoi pour analyse. Expédier les échantillons congelés sur glace sèche et les échantillons réfrigérés sur glace
L’expédition des prélèvements doit être confiée à une personne détenant un certificat de formation TMD, conformément au Règlement sur le TMD. Pour plus d’information sur la catégorisation des matières à des fins d’expédition, veuillez consulter la partie 2 de l’appendice 3 du règlement ou la section 3.6.2 du règlement de l’IATA sur les produits dangereux.
Infection par le virus de la dengue soupçonnée et antécédents de voyage pertinents. Les échantillons soumis seront d’abord analysés par le laboratoire de diagnostic des zoonoses virales au moyen d’un test test ELISA de détection des IgM/IgG spécifiques de la dengue, ce qui permettra de déterminer si le patient a développé des anticorps anti-flavivirus. Les échantillons réactifs peuvent être ensuite analysés à la recherche d’anticorps neutralisants. Les échantillons non réactifs (négatifs) ne seront pas soumis au PRNT.
Requête d’analyse pour les zoonoses virales complétée, incluant le nom, l’adresse et le numéro de téléphone du laboratoire expéditeur. Le nom ou l’identificateur (no de référence de l’échantillon) du patient, sa date de naissance, les analyse(s) demandée(s), date de prélèvement de l’échantillon, la date du début des symptômes, ainsi que l’histoire clinique et les antécédents de voyage du patient.
Pour la détection des anticorps dirigés contre le virus de la dengue, le PRNT est souvent réalisé en parallèle à des PRNT de détection d’autres flavivirus afin de pouvoir distinguer le virus responsable de la maladie en raison du taux élevé de séroprévalence du virus de la dengue.
Les tests sont effectués, en totalité ou en partie, au moyen d’une épreuve mise au point en laboratoire qui n’a pas été entièrement validée ni vérifiée, car il n’y a pas de panel bien caractérisé.
La détection d'anticorps d’IgG dans un seul sérum indique une exposition passée ou présente à cet virus. Une hausse par un facteur de 4 ou plus du titre d’anticorps neutralisants ou une séroconversion dans des sérums appariés est nécessaire pour classer un cas comme un « cas confirmé » de la maladie.
Les IgM peuvent persistent dans le sérum jusqu’à un an ou plus après l’exposition à un arbovirus. Par conséquent, la détection d'IgM en elle-même n'est pas suffisante pour confirmer une infection aiguë, mais est compatible avec une exposition à un moment indéterminé.
L’isolement d’un arbovirus ou détection des acides nucléiques par RT-PCR en temps réel dans un échantillon clinique constitue une preuve formelle de l’association du virus et de la maladie.
21 jours civils après la réalisation de l’épreuve ELISA préliminaire.
- WHO. 2007. Guidelines for plaque reduction neutralization testing of human antibodies to dengue viruses.