Détection sérologique des anticorps dirigés contre le virus de la fièvre jaune par PRNT
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Détails de la référence
Détection sérologique d’anticorps neutralisant le virus de la fièvre jaune au moyen du test de séroneutralisation par réduction des plages (PRNT).
- Fièvre jaune
Sérum. Volume minimum requis: 250 µL.
Tubes de 2 ml avec bouchon à vis.
Conserver les échantillons au réfrigérateur jusqu’au moment de leur envoi pour analyse. Expédier les échantillons sur blocs réfrigérants, glace ou glace sèche.
L’expédition des prélèvements doit être confiée à une personne détenant un certificat de formation TMD, conformément au Règlement sur le TMD. Pour plus d’information sur la catégorisation des matières à des fins d’expédition, veuillez consulter la partie 2 de l’appendice 3 du règlement ou la section 3.6.2 du règlement de l’IATA sur les produits dangereux.
Infection par le virus de la fièvre jaune (FJ) soupçonnée et antécédents de voyage pertinents OU confirmation du titre d’anticorps après la vaccination. Veuillez préciser les antécédents de vaccination sur la demande.
Requête d’analyse pour les zoonoses virales complétée, incluant le nom, l’adresse et le numéro de téléphone du laboratoire expéditeur. Le nom ou l’identificateur (no de référence de l’échantillon) du patient, sa date de naissance, les analyse(s) demandée(s), date de prélèvement de l’échantillon, la date du début des symptômes, ainsi que l’histoire clinique et les antécédents de voyage du patient.
Pour démontrer la séroconversion, tant les échantillons de la phase aiguë que les échantillons de la phase de convalescence doivent être testés en parallèle.
Les tests sont effectués, en totalité ou en partie, au moyen d’une épreuve mise au point en laboratoire qui n’a pas été entièrement validée ni vérifiée, car il n’y a pas de panel bien caractérisé.
Certaines épreuves de dosage sérologique peuvent donner lieu à d’importantes réactions croisées entre les anticorps dirigés contre des flavivirus (virus de la dengue, VNO, etc.). Le PRNT étant d’une spécificité analytique accrue, il peut être utilisé pour étayer la présence d’anticorps sériques spécifiques d’un flavivirus donné. Les échantillons sériques sont incubés avec le virus et, si des anticorps viraux neutralisants sont présents, ils seront liés au virus de la dengue et préviendront l’infection virale des cellules de culture, d’où une réduction du nombre de plaques détectées. Le titre neutralisant est exprimé par l’inverse de la dilution du sérum où l’on observe une réduction de 90 % du nombre de plaques détectées. Si le patient a été plus d’une fois la cible d’une infection à flavivirus, une réaction croisée pourrait rendre pratiquement impossible toute interprétation des résultats de cette épreuve, même si elle est plus spécifique.
Comme les anticorps anti-flavivirus ont des réactions croisées (VNO, dengue, etc.) une hausse par un facteur de 4 ou plus du titre d’anticorps neutralisants est nécessaire pour classer un cas comme un « cas confirmé » de la maladie.
L’isolement d’un arbovirus, détection des anticorps spécifiques au moyen du test de séro-neutralisation par réduction des plaques (PRNT) ou détection des acides nucléiques par RT-PCR en temps réel dans un échantillon clinique constitue une preuve formelle de l’association du virus et de la maladie et procure le statut de «cas confirmé».
14 jours civils.
- WHO. 2007. Guidelines for plaque reduction neutralization testing of human antibodies to dengue viruses